考马斯亮蓝法测蛋白质含量方法（考马斯亮蓝法测蛋白质含量）
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2023-09-03 09:30:01
摘要 大家好,小问来为大家解答以上问题。考马斯亮蓝法测蛋白质含量方法，考马斯亮蓝法测蛋白质含量这个很多人还不知道,现在让我们一起来看看吧！...
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1、公式是根据测量结果自己算出来的：考马斯亮蓝比色法是由Bradford等人建立 的1种测定微量蛋白质的方法L5]，考马斯亮蓝所含疏 水基团在酸性条件下与蛋白质的疏水微区具有亲和力，通过疏水作用与蛋白质相结合，形成的蓝色蛋白质一染料复合物，在595 nm处有最大吸光度，复合物1 h内保持稳定。
2、在一定的蛋白质浓度范围内，蛋白质一染料复合物在595nm处的吸光度与蛋白质含量成正比，因此可用于蛋白质含量的测定。
3、测定时，用同一种标准蛋白（自己选，如牛血清白蛋白，所选的标准蛋白最好是纯化的待测蛋白——但这是理想状态，一般选择氨基酸构成与待测蛋白相近的标准蛋白。
4、否则将影响测定结果）配制成覆盖待测样品蛋白浓度的标准蛋白溶液，然后加等量考马斯亮蓝G-250，混匀后用紫外分光光度计测定个标准蛋白样品的吸光值。
5、并测定待测样品（可稀释成几个不同浓度的样品同时测）的吸光值。
6、所有样品重复测三次。
7、最后以蛋白标准溶液浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
8、计算出回归方程。
9、如Y=aX+b让后把待测样品的吸光值代入回归方程，算出待测样品浓度。
10、只要上数据库一搜，这样的论文多的是，要加强自学能力呀！——赚点分真辛苦！。
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